Perbedaan antara YAC dan M13 Phage Vector | YAC vs M13 Phage Vector
Perbedaan Kunci - YAC vs M13 Phage Vector
Kloning DNA adalah proses penting yang memungkinkan penyebaran fragmen DNA organisme yang penting. Ini memerlukan gabungan DNA spesifik dengan DNA vektor untuk menciptakan DNA rekombinan yang berubah menjadi organisme inang. Vektor adalah molekul DNA yang berperilaku sebagai kendaraan untuk membawa bahan genetik asing ke dalam sel lain atau organisme. Ini harus mampu mereplikasi di dalam organisme inang dan menghasilkan banyak salinan DNA rekombinan. Ada berbagai jenis vektor yang digunakan dalam kloning DNA. Ragi kromosom buatan (YAC) dan vektor fage M13 adalah dua jenis di antaranya. Perbedaan utama antara vektor fag YAC dan M13 adalah bahwa YAC adalah kromosom buatan yang bereplikasi pada sel ragi sementara vektor fage M13 adalah DNA melingkar beruntai tunggal bakteriilag M13 yang bereplikasi di E Sel Coli.
DAFTAR ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Kunci
2. Apa itu YAC
3. Apa itu M13 Phage Vector
4. Perbandingan Side by Side - YAC vs M13 Phage Vector
5. Ringkasan
Apakah yang dimaksud dengan YAC Vector?
YAC adalah kromosom artifisial yang memiliki kemampuan untuk membawa sebagian besar DNA asing dan bereplikasi di dalam sel ragi. Ini memiliki sentromer, telomer dan replikasi secara otonom yang penting untuk replikasi dan stabilitas. YAC juga harus memiliki penanda selektif atau spidol dan lokasi restriksi untuk membuatnya menjadi vektor kloning yang efektif. Urutan besar mulai dari 1000 kb sampai 2000 kb dapat dimasukkan ke dalam YAC dan ditransfer ke ragi.
Gambar 01: YAC Vector
Apakah M13 Phage Vector itu?
Bacteriophage M13 adalah virus yang menginfeksi dan mereplikasi di E Coli. Genom bakteriofag M13 berukuran kecil, sekitar 6,7 kb. Ini adalah DNA rasa untai tunggal, melingkar dan positif. Virus ini secara khusus menginfeksi bakteri E Coli melalui pilus F. Begitu memasuki ssDNA ke dalam bakteri, ia mensintesis untai komplementernya dan menjadi dsDNA atau bentuk replika (RF) M13. RF dapat berperilaku seperti plasmid dalam organisme inang. DsDNA bereplikasi dalam E Coli dan menghasilkan ssDNA yang membawa fag baru. Fase baru ini terus dilepaskan dari E Coli tanpa membunuh sel inang. Namun, infeksi memperlambat pertumbuhan E Coli. dsDNA dapat diekstraksi dari sel bakteri dan digunakan sebagai vektor dalam kloning DNA.Mereka dikenal sebagai vektor fage M13. Mereka dapat dengan mudah dimanipulasi dan digunakan sama dengan vektor plasmid.
Kemampuan inheren infeksi fusi M13 ini berfungsi sebagai kualifikasi yang baik untuk digunakan sebagai vektor pada kloning gen. Saat mengembangkan M13 menjadi vektor, beberapa elemen harus dimasukkan ke dalam genomnya. Mereka adalah gen untuk protein lac represor (lac I), wilayah operator-proksimal gen lac Z, promotor lac dan beberapa situs kloning (polylinker). Bila dsDNA dari M13 digunakan sebagai vektor, ia dapat diperlakukan sebagai vektor plasmid. Namun, penggunaan ssDNA M13 memiliki kelebihan dalam sekuensing DNA dan mutagenesis yang diarahkan ke situs.
Karena vektor fage M13 memiliki banyak situs kloning di daerah lacZ, vektor rekombinasi dapat dengan mudah diidentifikasi dengan penyaringan koloni biru / putih pada piring agar mengandung IPTG dan X-Gal. Plakat biru yang diproduksi di piring tidak mengandung fase rekombinasi. Oleh karena itu, fag dengan sisipan dapat dipilih untuk tujuan kloning.
Gambar 02: Bacteriophage M13
Apa perbedaan antara YAC dan M13 Phage Vector?
YAC vs M13 Phage Vector
YAC adalah kromosom hasil rekayasa genetika yang memiliki kemampuan untuk membawa sebagian besar DNA asing dan bereplikasi di dalam sel ragi. |
|
M13 vektor fag adalah vektor virus yang dikembangkan oleh bakteriilago M13 yang digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam | E Coli. Tujuan |
YAC dirancang untuk mengkloning fragmen besar DNA genom menjadi ragi. | |
Fase vektor M13 digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam | E Coli. Sisipkan Panjang |
YAC dapat berisi sisipan genom berukuran megabase (1000 kb - 2000 kb). | |
Ukuran sisipan sekitar 1, 500 bps. | Konstruksi |
DNA YAC sulit dimurnikan secara utuh dan membutuhkan konsentrasi tinggi untuk menghasilkan sistem vektor YAC. | |
Itu terjadi melalui rantai elektron fotosintetik siklik. | Stabilitas |
YAC tidak stabil. | |
Fase M13 dapat dengan mudah diekstraksi. | Ukuran |
Enzim adalah molekul yang lebih besar. | |
Fase M13 stabil dari pada YAC. | Ringkasan - YAC vs M13 Phage Vector |
YAC adalah sistem vektor buatan yang dibuat dengan menggunakan daerah spesifik kromosom ragi untuk memasukkan segmen material genetik yang besar ke sel ragi. M13 vektor fage adalah sistem vektor yang berasal dari bakterioksa M 13 yang menggunakan
E coli sebagai organisme inang. Inilah perbedaan utama antara YAC dan M13 Phage Vector. Keduanya sama-sama berguna dalam teknologi DNA rekombinan dan kloning gen. Referensi:
1. "Vektor. "Genetika-catatan - Vektor. N. hal., n. d. Web. 16 Mei 2017. // genetika-catatan. wikispaces com / Vector
2. "Ragi kromosom buatan. "Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21 April 2017. Web. 16 Mei 2017..
Gambar Courtesy:
1. "M13B" Oleh J3D3 - Karya sendiri (CC BY-SA 3. 0) melalui Commons Wikimedia