Perbedaan antara ELISA Langsung dan Tidak Langsung | Langsung vs Tidak Langsung ELISA
Perbedaan Kunci - ELISA Langsung vs Tidak Langsung
Immunoassay terkait enzim (ELISA), juga dikenal sebagai enzim immunoassay, adalah tes serologis yang mendeteksi antibodi dalam darah . Ini digunakan sebagai alat diagnostik untuk mengetahui apakah pasien telah terpapar dengan jenis virus tertentu atau agen infeksius lain (antigen) dan apakah tubuh telah menghasilkan antibodi terhadap infeksi. ELISA juga dapat mengidentifikasi infeksi masa lalu dan saat ini. Oleh karena itu, ELISA sering digunakan sebagai tes prescreening oleh para dokter sebelum melakukan analisis penyakit secara mendalam. Tes ini bisa dilakukan di laboratorium dengan mengambil sampel darah dari pasien. Ada dua jenis tes ELISA: ELISA langsung dan ELISA tidak langsung. Perbedaan utama antara ELISA tidak langsung dan tidak langsung adalah ELISA tidak langsung lebih sensitif dan memerlukan penambahan antibodi sekunder sementara ELISA langsung kurang sensitif dan hanya menggunakan antibodi primer .
DAFTAR ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Kunci
2. Apa itu ELISA Langsung
3. Apa itu ELISA tidak langsung
4. Perbandingan Sisi-Sisi - Langsung vs Tidak Langsung ELISA
5. Ringkasan
Apa itu ELISA Langsung?
ELISA adalah tes diagnostik penyakit yang dilakukan untuk mengidentifikasi adanya antigen atau antibodi tertentu dalam darah. Hal ini dilakukan sebagai tes piring. Ini menggunakan antibodi yang terkait dengan enzim yang mudah diuji. Kehadiran antigen dalam sampel serum terikat dengan antibodi spesifik yang terkait dengan enzim. Pada tahap akhir, substrat spesifik ditambahkan untuk bereaksi dengan enzim. Enzim mengubah substrat menjadi produk penghasil warna atau sinyal. Perubahan warna pada substrat kimia menunjukkan adanya antibodi tertentu dalam sampel serum. Tes ELISA langsung hanya menggunakan antibodi primer yang terkait dengan enzim. Setelah mengikat antigen, dengan cepat berubah warna, menunjukkan adanya agen infeksius di dalam darah. Namun, intensitas sinyal lebih lemah pada ELISA langsung karena epitop terbatas pada pengikatan antigen. Oleh karena itu, ELISA langsung kurang sensitif dibandingkan ELISA tidak langsung.
Gambar 01: Uji ELISA Langsung
Apakah ELISA Tidak Langsung?
ELISA dapat dilakukan dengan menggunakan dua jenis antibodi yaitu; antibodi primer dan antibodi sekunder. Alat ELISA tidak langsung menggunakan kedua jenis antibodi untuk memperkuat sinyal agar terdeteksi lebih baik. Teknik ELISA tidak langsung dilakukan sebagai berikut.
- Pelat diinkubasi dengan antigen dan dicuci untuk menghalangi ikatan nonspesifik.
- Kemudian antibodi primer ditambahkan dan dicuci.
- Antibodi sekunder terkait enzim ditambahkan dan dicuci.
- Substrat ditambahkan dan dibiarkan bereaksi dengan enzim.
- Sinyal terdeteksi, dan ada atau tidak adanya antigen spesifik dalam sampel diidentifikasi.
Pada uji ELISA tidak langsung, beberapa antibodi sekunder dapat mengikat satu antibodi primer tunggal. Antibodi sekunder dihubungkan dengan enzim yang mudah diuji. Oleh karena itu, satu ikatan bisa membuat sinyal kuat karena lebih dari satu interaksi. Oleh karena itu, ELISA tidak langsung lebih sensitif daripada ELISA langsung. Namun, ELISA tidak langsung dapat membuat sinyal nonspesifik karena reaksi silang dari antibodi sekunder.
Gambar 02: Tes ELISA Tidak Langsung
Apa perbedaan antara ELISA Langsung dan Tidak Langsung?
- diff Article Middle before Table ->
Direct vs ELISA tidak langsung |
|
| ELISA langsung kurang sensitif dibandingkan ELISA tidak langsung. | ELISA tidak langsung lebih sensitif. |
| Waktu yang Diambil | |
| Tes ELISA langsung adalah proses yang cepat. | ELISA tidak langsung cukup menyita waktu. |
| Penggunaan Antibodi | |
| Hanya satu jenis antibodi (antibodi primer) yang digunakan dalam ELISA langsung. | Antibodi primer dan sekunder digunakan untuk ELISA tidak langsung. |
| Menghubungkan dengan Enzim | |
| Antibodi primer dikaitkan dengan enzim. | Antibodi sekunder dikaitkan dengan enzim. |
| Reaktivitas silang Antibodi Kedua | |
| ELISA langsung menghilangkan reaktivitas silang kedua antibodi. | ELISA tidak langsung dipengaruhi oleh reaktivitas silang dari antibodi kedua. Sinyal |
| Sinyal lemah dibandingkan dengan ELISA tidak langsung. | |
| Sinyal diperkuat secara tidak langsung ELISA. Oleh karena itu, mudah untuk dideteksi. | Ringkasan - ELISA Langsung vs. Tidak Langsung |
ELISA adalah teknik biokimia yang digunakan terutama dalam imunologi untuk mendeteksi adanya antibodi atau antigen pada sampel darah pasien. Hal ini dapat dilakukan melalui dua proses yang dikenal sebagai ELISA langsung atau tidak langsung. Uji ELISA langsung hanya menggunakan antibodi primer untuk mendeteksi antigen sementara ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer dan sekunder. Pada ELISA langsung, antibodi primer diberi label sedangkan antibodi sekunder ELISA tidak langsung diberi label. Inilah perbedaan antara ELISA langsung dan tidak langsung.
Referensi
1. "Uji imunosorben enzim-linked (ELISA). "Buletin Organisasi Kesehatan Dunia. U. S. Perpustakaan Nasional Kedokteran, 1976. Web. 29 Mar. 2017
2. Loon, A. M van, J. T Van Der Logt, F. W. Heessen, dan J. Van Der Veen. "Uji imunosorben terkait enzim yang menggunakan antigen berlabel untuk mendeteksi antibodi imunoglobulin M dan A pada toksoplasmosis: perbandingan dengan immunofluorescence tidak langsung dan uji imunosorben enzim ganda dengan enzim ganda. "Jurnal Mikrobiologi Klinik. U. S. Perpustakaan Nasional Kedokteran, Juni 1983. Web. 29 Mar. 2017
Gambar Courtesy:
1. "Diagram ELISA" Oleh Cavitri - Memiliki pekerjaan (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia
2. "ELISA tidak langsung" Oleh Cawang - Karya Sendiri (CC0) via Commons Wikimedia
