Perbedaan antara membran nitroselulosa dan nilon | Nitrocellulose vs Nylon Membrane

Anonim

Perbedaan Kunci - Membran Nitroselulosa vs Nylon

Blotting adalah teknik penting untuk mendeteksi urutan spesifik DNA, RNA, dan protein dari campurannya dalam biologi molekular. Hal ini dilakukan dengan menggunakan membran yang disebut blot. Ada teknik blotting yang berbeda seperti blotting utara, selatan dan barat. Memilih membran yang tepat untuk proses blotting harus dilakukan secara hati-hati untuk mencegah deteksi nonspesifik dan deteksi yang salah. Nitroselulosa, nilon, dan PVDF umumnya digunakan membran dalam teknik blotting. Mereka memiliki karakteristik yang berbeda. Perbedaan utama antara membran nitroselulosa dan nilon adalah membran nitrocellulose memiliki potensi imobilisasi protein yang tinggi sedangkan membran nilon memiliki potensi imobilisasi asam nukleat yang tinggi. Namun, kedua jenis membran ini sering digunakan dalam teknik blotting.

DAFTAR ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Kunci

2. Apa itu Membran Nitroselulosa

3. Apa itu Membran Nylon

4. Perbandingan Sisi-Sisi - Membran Nitroselulosa vs Nylon

5. Ringkasan

Apa itu Membran Nitroselulosa?

Membran nitroselulosa adalah filter membran yang umum digunakan dalam teknik asam nukleat dan teknik pengelupasan protein. Ini memiliki potensi mengikat protein tinggi. Oleh karena itu, membran nitroselulosa banyak digunakan dalam teknik blotting barat. Membran nitroselulosa kompatibel dengan semua teknik hibridisasi dan menunjukkan kapasitas pengikatan yang superior tanpa gangguan. Selaput nitroselulosa secara alami bersifat hidrofilik. Mereka membuat interaksi hidrofilik dengan molekul dan secara efisien melumpuhkannya ke membran. Selaput nitroselulosa komersial tersedia dalam dua ukuran pori-pori: 0. 45 dan 0. 2 μm.

Gambar 01: membran nitroselulosa yang digunakan di blotting barat

Apakah yang dimaksud dengan membran nilon?

Membran nilon adalah jenis membran komersial lainnya yang digunakan dalam teknik blotting. Ini juga digunakan dengan membran nitrocellulose untuk blotting selatan dan utara. Selaput nilon sangat ideal untuk blotting selatan daripada nitroselulosa karena afinitas tinggi untuk mengikat DNA. Karena beberapa fitur unik dari membran nilon, peneliti umumnya menggunakan membran nilon untuk selaput di sebelah selatan dan utara, bukan di atas selaput nitroselulosa. Selaput nilon juga direkomendasikan untuk pengupasan dan reprobing, tidak seperti nitroselulosa.

Gambar 02: Membran nilon yang digunakan untuk blotting selatan

Apa perbedaan antara Nitrocellulose dan Nylon Membrane?

- diff Article Middle before Table ->

Nitrocellulose vs Nylon Membrane

Selaput nitroselulosa bersifat getas. Selaput nilon kurang rapuh.
Penanganan
Sulit untuk ditangani. Mudah ditangani.
Reprobing
Selaput nitroselulosa yang tidak didukung sulit untuk dilepaskan. Reprobing mudah dengan selaput nilon.
Kompatibilitas dengan Berbagai Kondisi Penyimpanan
Membran nitroselulosa memiliki kekuatan yang lebih sedikit untuk menahan berbagai kondisi penyimpanan. Selaput nilon merespons lebih kuat terhadap berbagai kondisi penyimpanan.
Gunakan
Prewetting diperlukan. Prewetting tidak diperlukan untuk membran nilon.
Sifat hidrofilik
Selaput hidroselulosa bersifat hidrofilik tetapi kurang hidrofilik daripada membran nilon. Mereka sangat hidrofil. Potensi Imobilisasi
Membran nitroselulosa kurang mendapat afinitas untuk asam nukleat. Tapi itu memiliki afinitas tinggi untuk protein.
Selaput nilon memiliki potensi pengikat yang tinggi dengan asam nukleat daripada membran nitroselulosa. Ringkasan - Membran Nitroselulosa vs Nylon

Selaput nitroselulosa dan nilon adalah lembaran khusus yang digunakan dalam teknik blotting untuk mereproduksi pola pita pada gel. Mereka memungkinkan kemungkinan untuk mendeteksi urutan tertentu atau protein dari campuran dengan cara melumpuhkannya pada membran. Setelah molekul diimobilisasi pada membran, ia dapat digunakan sebagai substrat untuk analisis hibridisasi dengan probe berlabel. Membran nitroselulosa umum digunakan untuk deteksi protein pada teknik blotting barat karena afinitas pengikatannya yang tinggi dengan protein. Selaput nilon sering digunakan untuk blotting selatan dan utara. Ini adalah perbedaan antara selaput nitroselulosa dan nilon.

Referensi:

1. Hayes, P. C., C. R. Wolf, dan J. D. Hayes. "Teknik blotting untuk mempelajari DNA, RNA, dan protein. "BMJ: British Medical Journal. U. S. Perpustakaan Nasional Kedokteran, 14 Oktober 1989. Web. 07 Apr. 2017

2. Mahmood, Tahrin, dan Ping-Chang Yang. "Western Blot: Teknik, Teori, dan Trouble Shooting. "Jurnal Ilmu Kesehatan Amerika Utara. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Sept. 2012. Web. 07 Apr. 2017

Gambar Courtesy:

1. "Western blot transfer" Oleh Bensaccount di Wikipedia bahasa Inggris (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia